Prueba de 3

Precisión observada con el uso de gotas de sangre seca tomadas para la detección de recién nacidos

por Patricia Inácio, PhD | 30 de agosto de 2023

La medición de los niveles de 3-O-metildopa (3-OMD) en las gotas de sangre seca utilizadas en los programas de detección de recién nacidos podría ayudar a diagnosticar la deficiencia de L-aminoácido descarboxilasa aromática (AADC) en una etapa temprana de la vida, sugiere un estudio realizado en Taiwán.

Los resultados de 157.371 recién nacidos mostraron que seis de los ocho bebés que tenían niveles de 3-OMD superiores a lo normal portaban mutaciones que causaban enfermedades y desarrollaron síntomas de deficiencia de AADC.

La prueba "podría integrarse fácilmente en los programas existentes de detección de recién nacidos y facilitar su aplicación futura para un diagnóstico temprano y un tratamiento eficaz", escribieron los investigadores.

El estudio, “Determinación optimizada de 3-O-metildopa en gotas de sangre seca: detección prospectiva de la deficiencia de l-aminoácido descarboxilasa aromática”, se publicó en la revista Molecular Genetics and Metabolism.

Normalmente, la deficiencia de AADC es causada por mutaciones en ambas copias del gen DDC, que proporciona la información para producir la L-aminoácido descarboxilasa aromática, una enzima también conocida como AADC.

Esta enzima es necesaria para producir dos neurotransmisores principales: dopamina y serotonina. Los neurotransmisores son sustancias químicas utilizadas por las células nerviosas para comunicarse entre sí.

Las mutaciones hacen que la enzima sea defectuosa o se produzca en niveles inferiores a los necesarios. Esto conduce a síntomas que se manifiestan con mayor frecuencia en los primeros seis meses de vida, incluido un tono muscular bajo y la imposibilidad de alcanzar los hitos del desarrollo.

Sin embargo, un diagnóstico de deficiencia de AADC “a menudo se retrasa debido a la falta de conocimiento de la enfermedad y [la falta de] exámenes de laboratorio específicos”, escribieron los investigadores.

El uso generalizado de una forma relativamente fácil y rápida de diagnosticar esta enfermedad también es cada vez más importante, con un primer tratamiento modificador de la enfermedad, la terapia génica Upstaza (eladocagene exuparvovec), aprobada en la Unión Europea y el Reino Unido.

Los estudios han demostrado que medir los niveles de 3-OMD en gotas de sangre seca podría ayudar a diagnosticar la deficiencia de AADC. Sin una enzima AADC que funcione, los precursores de dopamina como la L-dopa se acumulan dentro de las células y se descomponen en 3-OMD, por lo que también está presente en niveles elevados en pacientes con deficiencia de AADC.

Investigadores en Taiwán demostraron anteriormente que las medidas de 3-OMD podrían integrarse en los programas de detección de recién nacidos, utilizando una sola gota de sangre seca recolectada a los pocos días de nacer.

Los niveles de 3-OMD ayudaron a identificar a cuatro recién nacidos con deficiencia de AADC de un total de 127.987 recién nacidos, y estos bebés pudieron participar en ensayos de terapia génica, "lo que resultó en una mejora motora y cognitiva significativa", escribió el equipo.

Este mismo equipo describió ahora un método rápido y altamente específico para detectar la deficiencia de AADC como parte de la detección sistemática de errores metabólicos congénitos en recién nacidos en Taiwán.

Las muestras de sangre seca recolectadas 48 horas después del nacimiento se analizaron primero para detectar 3-OMD y otros metabolitos utilizando el kit NeoBase 2, que utiliza una técnica llamada análisis de inyección de flujo y espectrometría de masas en tándem para identificar y cuantificar moléculas.

El uso de un kit reduce el tiempo y la preparación de muestras y permite a los investigadores realizar cientos de pruebas al día.

Las muestras con niveles de 3-OMD fuera del rango normal se analizaron nuevamente con una técnica más específica, llamada cromatografía líquida de alta resolución-espectrometría de masas en tándem.

Si nuevamente se encontraba que el nivel de 3-OMD era más alto de lo normal (500 nanogramos por mililitro, o ng/mL), se remitía al recién nacido al hospital de los investigadores para un examen físico y pruebas genéticas para confirmar la deficiencia de AADC.

Entre febrero de 2020 y diciembre de 2022 se analizaron gotas de sangre seca de 157.371 recién nacidos con el kit NeoBase 2. Un total de 114 muestras (0,1%) fueron analizadas con la técnica más específica, y ocho de ellas mostraron niveles anormales de 3-OMD, que oscilaron entre 839 y 5.170 ng/ml.

Los análisis genéticos confirmaron que seis de los ocho casos (75%) portaban mutaciones en ambas copias del gen DDC, más comúnmente c.714+4A>T, y a estos bebés se les diagnosticó deficiencia de AADC. Los seis desarrollaron posteriormente síntomas de deficiencia de AADC alrededor de los 6 meses de edad.

Estos hallazgos se tradujeron en una incidencia de enfermedad de 1 de cada 26.229 recién nacidos.

Se descubrió que uno de los dos recién nacidos restantes con niveles anormalmente altos de 3-OMD tenía una mutación que causaba la enfermedad en solo una copia de DDC, y la otra copia portaba una mutación con un efecto desconocido.

Dado que este bebé mostraba un desarrollo normal y los niveles de 3-OMD cayeron a casi lo normal durante el seguimiento, no se realizaron más análisis ni tratamientos para la deficiencia de AADC.

El otro recién nacido no tenía mutaciones de DDC que causaran enfermedades y se alcanzaron niveles de 3-OMD casi normales durante el seguimiento.

Posteriormente, dos recién nacidos adicionales con niveles de 3-OMD muy cercanos al límite superior normal en la primera prueba se sometieron a pruebas genéticas. Fueron negativos para mutaciones en DDC y otros genes que podrían aumentar los niveles de 3-OMD y, finalmente, estos niveles disminuyeron.

Estos últimos tres casos se consideraron falsos positivos.

"En conclusión, hemos demostrado una determinación conveniente y simplificada de 3-OMD en muestras [de sangre seca], perfectamente integrada en nuestro programa ampliado de detección de recién nacidos sin interrumpir el flujo de trabajo existente", escribió el equipo.

"Ampliar el uso de esta prueba rápida y conveniente a otros centros... puede identificar a más pacientes a través de exámenes de detección de recién nacidos o programas de grupos de alto riesgo, lo que resulta en una mejor atención al paciente y mejores resultados", concluyeron los investigadores.